喉癌eIF4E基因的体外转录

摘要：

目的 克隆喉癌eIF4E基因编码区的cDNA序列,并构建其体外转录载体,获得eIF4E基因编码区mRNA,以便进一步的体外实验研究.方法 利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法,以喉癌Hep-2细胞mRNA为模板,扩增获得全长eIF4E编码区eDNA,与pMD18T连接作全自动测序,并利用基因重组技术构建eIF4E基因mRNA体外转录载体pGEM-7 zf+eIF4E.用内切酶XhoI将含有eIF4E基因mRNA的pGEM-7 zf+eIF4E质粒消化成线性,以此为模板体外转录出用[a-32P]UTP标记的靶eID4E基因编码区mRNA.结果 经测序证实获得的eIF4E基因cDNA序列与Gene Bank一致,并成功构建了体外转录质粒pGEM-7 zf+eIF4E.结论 成功构建了体外转录质粒pGEM-7 zf+eIF4E,为进一步研究eIF4E的功能奠定了基础.

关键词：真核细胞翻译起始因子-4E、体外转录、逆转录多聚酶链反应、喉肿瘤

所属期刊栏目：14

分类号：R739;Q343.1(肿瘤学)

资助基金：吉林大学青年创新基金K203

在线出版日期：2008-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：251-254