人Hath1-cDNA基因的克隆及其真核表达载体的构建

摘要：

目的 克隆人Hath1-cDNA基因,构建其真核表达载体pIRES2-DsRed2-Hath1.方法 从人的全血标本中提取DNA模板,经PCR获得Hath1-cDNA,将Hath1-cDNA和pIRES2-DsRed2质粒用限制性内切酶XhoⅠ、EcoRⅠ双酶切,酶切产物琼脂糖凝胶电泳,割胶纯化,前者回收1065 bp大小片断,后者回收大片断,再将回收的2个片断用T4 DNA连接酶连接,转化DH5α,挑选单克隆,提取质粒,所提质粒进行双酶切鉴定并测序.结果 成功地从人全血中克隆出Hath1-cDNA,并构建了其真核表达载体pIRES2-DsRed2-Hath1.结论 pIRES2-DsRed2-Hath1的构建为Hath1基因转染致聋小鼠耳蜗的实验奠定了基础.

关键词：Hath1、基因克隆、真核表达载体、耳蜗

所属期刊栏目：13

分类号：R764.35(耳鼻咽喉科学)

资助基金：江苏省南京市医学科技发展计划ZKX0207;ZKX06019

在线出版日期：2007-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：178-181