布鲁菌实时荧光定量聚合酶链式反应试剂盒临床样本检测探索

摘要：

目的 采用布鲁菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,探讨布鲁菌的早期、快速检测,为临床医生对布鲁菌感染的诊断提供指导.方法 根据布鲁菌表面蛋白31基因序列设计引物和探针,建立布鲁菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,并验证反应体系的特异性(布鲁菌标准株16M、544A、1330S、菌苗株104M,参考菌株小肠结肠炎耶尔森菌O:9、大肠埃希菌O:157)、重复性(4种不同浓度的标准品),分析反应体系的最低检测限.结果 所建立的检测方法仅能对布鲁菌进行特异性扩增;反应体系中不同底物浓度与循环(Ct)值之间呈良好的线性关系(Y=-2.77X+ 43.19,R2=0.994 8),反应体系的最低检测限为1×103 copies/ml;对布鲁菌标准株16M、544A、1330S与104M的检测结果为阳性,O:9型小肠结肠炎耶尔森菌、O∶157大肠杆菌的检测结果为阴性;4种不同浓度的标准品和阴性质控品进行4次重复检测,变异系数分别为0.15％、0.16％、0.23％、0.18％.结论 利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,可快速、准确地检出布鲁菌,对临床布鲁菌病的诊断有指导意义.

关键词：布鲁菌、感染、荧光、实时定量PCR

所属期刊栏目：35

分类号：R378.2;S852.61;R446.5

在线出版日期：2016-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：817-820