核心蛋白聚糖表达减少与大骨节病软骨坏死的相关性研究

摘要：

目的 观察大骨节病(KBD)儿童手指关节软骨和低硒条件下T-2毒素中毒大鼠膝关节软骨核心蛋白聚糖(Decorin)的表达,以及T-2毒素和硒对培养软骨细胞Decorin表达的影响,分析Decorin与KBD软骨坏死的相关性.方法 以5例尸检KBD儿童(KBD组)和5例因车祸死亡或畸形手术儿童(对照组)手指关节软骨为研究对象,采用免疫组织化学染色法检测儿童手指关节软骨Decorin的表达情况.选取雄性健康SD大鼠32只,按体质量采用随机数字表法分为常规组、低硒组,每组16只,常规组饲料硒含量为101.5 μg/kg,低硒组饲料硒含量为1.1 μg/kg,30 d后常规组又分为常规组和常规+T-2组,低硒组分为低硒组和低硒+T-2组,每组8只,T-2毒素(100 μg/kg,每日2次)采取灌胃饲养,30 d后处死大鼠,取左侧膝关节,用免疫组织化学染色方法检测大鼠关节软骨细胞Decorin表达.体外培养人软骨细胞系C28/I2细胞,加入不同浓度的T-2毒素(0、1、6、12 μg/L)和硒(0、0.1 rmg/L)作用72 h,采用实时荧光定量PCR法检测Decorin mRNA表达.结果 KBD组儿童手指关节软骨表、中、深层Decorin阳性软骨细胞密度”(1.75土0.95)％、(8.92±3.45)％、(0.00±0.00)％”均低于对照组”(21.27±3.44)％、(78.70±8.82)％、(93.12±6.99)％,t=11.76、12.87、31.09,P均＜0.05”.低硒+T-2组大鼠膝关节软骨Decorin表达阳性率”(19.33±2.82)％”明显低于常规组、低硒组及常规+T-2组”(62.67±5.33)％、(53.17±2.41)％、(34.50±2.64)％,P均＜0.05”.在硒为0 mg/L时,6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达(0.38±0.01、0.26±0.03)明显低于0μg/L T-2毒素(对照)组(1.00±0.00,P均＜0.05).在硒为0.1 mg/L时,0、6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达(1.53±0.06、1.92±0.04、2.50±0.01)高于相同剂量单纯T-2毒素组(1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00,P均＜0.05).结论 KBD儿童和低硒条件下T-2毒素中毒大鼠的关节软骨Decorin表达减少,T-2毒素可致体外培养软骨细胞Decorin mRNA表达明显降低,且有明显的剂量效应关系,硒可以部分对抗这种抑制作用.Decorin参与大骨节病软骨细胞死亡和基质降解的病理过程.

关键词：大骨节病、核心蛋白聚糖、T-2毒素

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资助基金：国家自然科学基金81273006、30872187;教育部留学回国人员启动基金11回国基金01;National Natural Science Foundation of China81273006,30872187;The Project Sponsored by the Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars,State Education Ministry11return funds 01

在线出版日期：2016-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：725-730