氟中毒对人肝癌细胞线粒体凋亡及其相关蛋白的影响

摘要：

目的 探讨氟中毒对人肝癌细胞(HepG2)线粒体凋亡及其相关蛋白的影响.方法 体外培养HepG2细胞24h,分别采用0(对照)、1、3、6、9 mmol/L氟化钠(NaF)处理细胞24 h(n=5).四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞毒性作用;提取对照组和3 mmol/L NaF处理组(氟处理组)细胞RNA和蛋白(n=6),实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测HepG2细胞中线粒体凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)mRNA和蛋白的表达;蛋白免疫印迹法检测线粒体凋亡途径相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cells lymphoma-2,Bcl-2)与Bcl-2共沉淀的X蛋白质(Bcl-as-sociated X protein,Bax)、细胞色素C(cytochrome C)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)9和3蛋白的表达.结果 0、1、3、6、9 mol/L氟处理组MTT法检测结果分别为0.307±0.031、0.333±0.028、0.230±0.011、0.178±0.001、0.152±0.003,组间比较差异有统计学意义(F=82.224,P＜0.01).氟处理组AIF mRNA表达[(153.14±5.41)％]高于对照组[(100.00±4.70)％,t=-4.73,P＜0.05];AIF、Bcl-2、eytochrome C(在细胞质中)、caspase9、caspase3蛋白表达[(152.16±47.30)％、(171.90±51.52)％、(458.00±19.48)％、(527.17±200.67)％、(432.70±64.27)％]均高于对照组[(100.00±48.86)％、(100.00±34.44)％、(100.00±116.59)％、(100.00±19.58)％、(100.00±137.16)％,t=-3.80、-3.96、-15.76、-4.67、-5.06,P均＜0.05];而Bax、cytochrome C(在线粒体中)蛋白表达[(24.66±26.04)％、(72.99±45.34)％]均低于对照组[(100.00±44.01)％、(100.00±34.14)％,t=6.35、0.68,P均＜0.05].结论 线粒体凋亡相关蛋白以及线粒体细胞凋亡途径可能参与了氟化物诱导HepG2细胞凋亡发生的病理机制.

关键词：氟化物中毒、线粒体、细胞凋亡

所属期刊栏目：35

分类号：R735.7;R285.5;R979.1

在线出版日期：2016-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：547-551