10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2007.06.009
小鼠甲状腺细胞原代培养及鉴定
目的 分离培养小鼠甲状腺细胞,为探讨甲状腺功能调节和疾病发生提供一种体外模型.方法 取6~8周龄Balb/c小鼠甲状腺,用胶原酶-中性蛋白酶双酶法分离甲状腺滤泡上皮细胞.用含10%胎牛血清(FCS)的F-12培养基培养,细胞贴壁后FCS降至5%,另外添加促甲状腺激素(TSH)、氢化可的松、转铁蛋白、胰岛素和L-谷氨酰胺.光镜下对不同培养时间的细胞进行形态学观察,并结合免疫细胞化学染色法、RT-PCR法和电化学发光免疫法对培养小鼠甲状腺细胞从形态、甲状腺球蛋白(Tg)、Tg特异抗原蛋白表达、甲状腺过氧化物酶(TPO)、钠碘转运子(NIS)、促甲状腺激素受体(TSH-R)等特异基因mRNA表达和甲状腺激素T3、T4分泌功能等方面进行鉴定.结果 小鼠甲状腺细胞在体外呈贴壁式生长,具有上皮样细胞特点;Tg染色呈胞浆阳性,并具有特异TPO、Tg、NIS、TSH-R mRNA表达和分泌T3、T4的功能,但其表达与分泌量有随培养时间的延长呈递减趋势.结论 成功建立小鼠甲状腺细胞原代培养模型,可用于甲状腺功能与疾病研究.
甲状腺、原代细胞培养、小鼠、鉴定
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R3(基础医学)
2008-03-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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