戊二酰辅酶A脱氢酶基因沉默及高浓度赖氨酸对BRL肝细胞活性的影响

摘要：

目的 探讨戊二酰辅酶A脱氢酶(GCDH)基因沉默和赖氨酸代谢物蓄积对肝细胞活性的影响.方法 将BRL肝细胞分为正常对照组、阴性对照组和GCDH沉默组.构建含靶向沉默GCDH基因的shRNA慢病毒载体,分别用该病毒和阴性对照病毒感染GCDH沉默组和阴性对照组BRL肝细胞.感染后细胞再用含5 mmol/L赖氨酸培养基培养.免疫荧光技术检测慢病毒感染效率;Western blot法检测GCDH蛋白表达水平;MTT法检测细胞活性,Hoechest 33342染色检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞凋亡的经典指标Caspase3水平.结果 构建的慢病毒可有效沉默肝细胞GCDH表达(P<0.01).MTT及Hoechest 33342染色检测各组间细胞活性及细胞凋亡比较差异无统计学意义(P>0.05).Caspase3蛋白表达在各组间比较差异亦无统计学意义(P>0.05).结论 GCDH基因沉默和赖氨酸代谢物蓄积对肝细胞无明显损伤作用.

关键词：戊二酰辅酶A脱氢酶、细胞活性、BRL细胞

所属期刊栏目：19

分类号：R75;R73

在线出版日期：2017-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1014-1019