肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞凋亡和细胞色素C基因表达的影响

摘要：

目的 目前认为神经细胞凋亡在新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)的病理过程中起重要作用,细胞色素C(CytC)是重要的促凋亡蛋白因子之一.近年研究发现,肌苷对成年大鼠脑缺血损伤有保护作用,肌苷可降低CytC mRNA的表达从而抑制神经细胞凋亡.本实验通过观察肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经细胞凋亡和细胞色素C基因表达的影响,以初步探讨肌苷对HIBD新生大鼠脑保护作用和可能的机制.方法 健康7日龄SD大鼠140只被随机分为3组:正常对照组(n=40),肌苷治疗组(n=50)和HIBD组(n=50),其中肌苷治疗组和HIBD组分别再随机分为缺氧缺血(HI)后6 h,12 h,1 d,3 d,7 d5个亚组(各亚组n=10).通过分离、结扎左颈总动脉和8%低氧暴露制备HIBD动物模型.正常对照组不进行缺氧缺血处理,按肌苷治疗组和HIBD组各相同时间点随机分为5个亚组(各亚组n=8).肌苷治疗组于模型制备后即刻开始腹腔注射肌苷注射液100 mg/kg,每天2次,连续7 d.以TUNEL法检测神经元凋亡情况,原位杂交技术测定CytC mRNA表达情况.结果 正常对照组皮质区和海马区可见少许凋亡细胞和CytC阳性细胞,HI后6 hHIBD组皮质区和CA1区凋亡细胞和CytC阳性细胞即见增多,于HI后1 d达高峰,之后逐渐下降,HI后7 d凋亡细胞和CytC阳性细胞数仍明显高于正常对照组,各时间点与正常对照组相比较,差异有显著性意义(P＜0.05).经肌苷治疗后凋亡细胞数和神经细胞CytC mRNA表达均减少,各时间点与HIBD组相应时间点比较,差异有显著性意义(P＜0.05).直线相关分析显示HIBD后,凋亡细胞数与CytC mRNA表达呈显著正相关(r=0.88,P＜0.01).结论 HI损伤后给予肌苷干预能减少HI导致的神经细胞凋亡,下调CytC mRNA表达.肌苷治疗后,新生HIBD大鼠的凋亡细胞数减少与CytC mRNA表达下调呈显著正相关,提示肌苷可能通过抑制CytC mRNA表达从而起到减少细胞凋亡、保护神经元的作用.

关键词：缺氧缺血、脑、肌苷、凋亡、细胞色素C、新生大鼠

所属期刊栏目：8

分类号：R-33(医学研究方法)

在线出版日期：2006-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：266-271