干预Wip1基因对人肝癌细胞系Huh-7的影响

摘要：

目的 干预人肝癌细胞系Huh-7的野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因的表达,并观察其细胞生物学特性的变化.方法 采用转染法,将促进Wip1基因表达的质粒和抑制Wip1基因表达的小干扰RNA(siRNA)分别转染Huh-7细胞.质粒转染的Huh-7细胞为质粒转染组,未经质粒转染的为未转染组,siRNA转染的为siRNA干扰组,用Negative Control siRNA转染的为NC组.转染后,行Western blot、CCK-8、细胞划痕、Transwell实验,检测各组细胞生物学特性的变化.结果 质粒转染后,Huh-7细胞Wip1蛋白的表达上调,细胞增殖促进,增殖率在107.42％～ 176.36％之间.未转染组在0～24h、～48 h、～72 h时的迁移距离分别小于质粒转染组:[(34.78±4.77) μm vs (61.60±2.02) μm,(33.98±3.48)μm vs (64.75±4.67) μm,(35.49±0.90) μm vs(67.89±4.23)μm,P均＜0.01].未转染组3次Transwell实验的细胞迁移数均少于质粒转染组:[(90.00±3.00)vs (178.67±5.77),(74.33±26.95)vs(209.00±32.91),(79.33±20.74)vs (208.67±73.24),P均＜0.01].siRNA转染后,Huh-7细胞Wipl蛋白的表达下调;细胞抑制率在12.37％ ～40.81％之间;NC组在0～24h、～48 h、～72 h时的迁移距离分别大于siRNA干扰组:[(31.24±4.42) μm vs (16.04±6.21)μ m,(31.33±2.13)μm vs (18.20±5.67)μm,(32.45±3.08) μm vs (18.99±5.32) μm,P均＜0.01];NC组3次Transwell实验的细胞迁移数均多于siRNA干扰组:[(74.00±12.17)vs(33.00±10.44),(77.00±5.00)vs (32.67 ±2.08),(81.33±17.16)vs (29.30±2.51),P均＜0.01].结论 促进Huh-7细胞Wip1基因表达后,其Wip1蛋白的表达上调,细胞增殖、迁移、侵袭能力增强.抑制Huh-7细胞Wip1基因表达后,其Wip1蛋白的表达下调,细胞增殖、迁移、侵袭能力被抑制.

关键词：肝癌、磷酸酶1基因、质粒转染、小干扰核糖核酸、细胞生物学特性

所属期刊栏目：29

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然基金面上项目81373172

在线出版日期：2016-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1297-1302