NOL8对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

摘要：

背景与目的:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部鳞状细胞癌中最普遍的亚型,其发病机制尚不清楚.核仁蛋白8(nucleolar protein 8,NOL8)作为RNA结合蛋白(RNA-binding protein,RBP),在多种肿瘤的发生、发展中发挥关键作用,但其在OSCC中的作用尚不清楚,本研究旨在探讨NOL8在OSCC中的表达水平,并研究其对OSCC细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响.方法:利用基因表达谱交互分析2(gene expression profiling interactive analysis 2,GEPIA2)、肿瘤免疫评估资源(tumor immune estimation resource,TIMER)、阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析(the University of Alabama at Birmingham cancer data analysis portal,UALCAN)及RNA相互作用数据库(the encyclopedia of RNA interactomes,ENCORI)在线分析NOL8在头颈鳞癌组织中的表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测NOL8在OSCC细胞中的mRNA表达水平.利用siRNA干扰技术下调NOL8在CAL-27细胞中的表达,形成NOL8敲低组(si-NOL8-1,si-NOL8-2)及阴性对照组;通过慢病毒转染技术感染CAL-27及HN6细胞过表达NOL8,形成NOL8过表达组及阴性对照组.分别通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验、划痕愈合试验及transwell实验检测NOL8表达水平变化后对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测NOL8表达水平改变后对EMT相关基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达的影响.利用裸鼠皮下移植瘤模型探究NOL8在体内对OSCC细胞增殖的影响.结果:GEPIA2、TIMER、UALCAN及ENCORI在线分析显示,与头颈鳞癌的癌旁正常组织相比,NOL8在头颈鳞癌组织中表达升高;RTFQ-PCR结果显示,与正常对照细胞相比,NOL8在OSCC细胞系中的mRNA表达显著上调.转染si-NOL8-1及si-NOL8-2的CAL-27细胞中NOL8的相对表达量显著低于阴性对照组;敲低NOL8表达后,CCK-8实验、划痕愈合试验及transwell实验结果显示,CAL-27细胞增殖能力、细胞迁移率和细胞侵袭数明显降低.NOL8过表达的CAL-27及HN6细胞中NOL8的相对表达量显著高于对照组;NOL8过表达组中CAL-27及HN6细胞增殖能力、细胞迁移率和细胞侵袭数均显著高于阴性对照组.Western blot结果显示,在CAL-27细胞中,与敲低对照组相比,敲低NOL8后E-cadherin表达升高,N-cadherin和vimentin表达降低;在CAL-27及HN6细胞中,与过表达对照组相比,过表达NOL8后E-cadherin表达下降,N-cadherin和vimentin表达升高.裸鼠皮下移植瘤模型实验发现,与NOL8对照组相比,NOL8过表达组的皮下移植瘤重量显著升高.结论:NOL8在OSCC中高表达,可促进OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭,该作用可能与EMT过程有关.

关键词：口腔鳞状细胞癌、核仁蛋白8、增殖、迁移、侵袭

所属期刊栏目：33

分类号：R739.85(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金;潍坊医学院博士启动基金;山东省高等学校青创人才引育计划

在线出版日期：2023-02-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：45-53