环状RNA hsa_circ_0058514在三阴性乳腺癌中的表达及作用研究

摘要：

背景与目的:环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类具有重要调节潜能的非编码RNA,参与多种肿瘤的发生、发展,但对于三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)尚未见报道.该研究旨在探讨环状RNA hsa_circ_0058514在TNBC发生、发展中的作用.方法:采用RNA测序(RNA sequencing,RNA-seq)对4对TNBC组织和癌旁组织进行分析,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time lfuorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)对20对TNBC组织和癌旁组织以及正常人乳腺上皮细胞MCF-10A和TNBC细胞MDA-MB-231和BT-549中hsa_circ_0058514的表达进行验证.将干扰质粒pLL3.7-sh-circ转染TNBC细胞MDA-MB-231和BT-549后,采用RTFQ-PCR检测细胞中hsa_circ_0058514的表达;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和EdU实验检测细胞增殖;采用划痕和Transwell小室实验分别检测细胞迁移和侵袭;采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白E1(cyclin E1,CCNE1)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)蛋白的表达.结果:环状RNA hsa_circ_0058514在TNBC组织和细胞中显著高表达(P<0.001,P<0.01);转染pLL3.7-sh-circ后,TNBC细胞中hsa_circ_0058514的表达量显著低于对照组(P<0.001).下调hsa_circ_0058514后,TNBC细胞增殖、迁移及侵袭能力下降,并促进细胞凋亡,导致细胞周期阻滞.Western blot结果显示,转染pLL3.7-sh-circ后,CCNE1和CDK2蛋白的表达下调(P<0.05).结论:环状RNA hsa_circ_0058514在TNBC组织和细胞中均高表达,其在TNBC发生、发展中可能起到癌基因的作用,并有望成为TNBC治疗的新靶点.

关键词：环状RNA、三阴性乳腺癌、hsa_circ_0058514、增殖、凋亡、细胞周期

所属期刊栏目：29

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81672536

在线出版日期：2019-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：9-18