Piwil2调控宫颈癌细胞恶性生物学行为的机制探讨

摘要：

背景与目的:Piwil2在肿瘤干细胞及癌前干细胞中高表达,通过转录和转录后调控机制调控多种基因表达,与肿瘤发生、发展密切相关.该研究探讨Piwil2与宫颈癌细胞恶性生物学行为之间的关系及可能的调控机制.方法:构建慢病毒载体pLenti-CMV-Piwil2-SV40-EGFP和shPiwil2质粒,分别转染HeLa和SiHa细胞,建立过表达/沉默Piwil2表达稳转细胞株,反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)及蛋白[质]印迹法(Western blot)鉴定转染效果;采用CCK-8法检测细胞增殖能力;PI染色后,流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)检测细胞周期;Western blot检测细胞增殖及周期相关调控蛋白表达;采用维拉帕米(verapamil)处理细胞,Hoechst 33342染色,FACS检测侧群(side polulation,SP)细胞比例;CCK-8法检测顺铂对细胞的杀伤活性.结果:过表达Piwil2上调HeLa和SiHa细胞S期及G2/M期细胞比例,进而促进细胞增殖,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);沉默Piwil2表达则细胞发生G0/G1期阻滞,抑制细胞增殖(P<0.05);Piwil2上调cyclin D1表达,提高Stat3磷酸化水平,下调p53表达;Piwil2显著上调HeLa和SiHa细胞中SP细胞比例(P<0.01),提高宫颈癌细胞对顺铂的耐药性(P<0.01);沉默Piwil2则相反,显著提高对顺铂的敏感性.结论:Piwil2上调SP细胞比例,促进宫颈癌进展;Piwil2可作为宫颈癌的潜在治疗靶点.

关键词：Piwil2、子宫颈癌、侧群细胞、耐药

所属期刊栏目：27

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81372779,81372777

在线出版日期：2019-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：921-927