沉默YAP逆转肺癌PC9细胞多柔比星耐药性及其机制研究

摘要：

背景与目的：耐药性是导致肺癌患者化疗失败的主要原因。探讨YAP对人肺癌PC9细胞多柔比星耐药的逆转作用及其机制。方法：利用体外筛选方法从多柔比星敏感性肺癌细胞系PC9获得耐药细胞克隆，并检测YAP的表达水平；利用shRNA沉默细胞中YAP的表达，应用MTS法检测肿瘤细胞药物敏感性，流式细胞术检测细胞周期、凋亡及对Rh-123的吸收能力，蛋白[质]印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction，QRT-PCR)技术检测ABCB1、ABCC1、p53、Runx2、ITGB2和ErbB4的表达水平及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase，AKT)的磷酸化水平变化。结果：经体外诱导获得多柔比星耐药细胞克隆PC9/Adr，且YAP蛋白在其中高表达，利用shRNA得到不同YAP沉默程度的PC9/Adr。YAP沉默后，细胞生长速度降低，细胞对多柔比星的敏感性显著增加，细胞周期被阻滞在G0/G1期，多柔比星诱导的细胞凋亡增多，细胞吸收Rh-123也增多，并与YAP的沉默程度呈正相关。Western blot和QRT-PCR结果显示，YAP沉默后，ABCB1、ABCC1、Runx2、ITGB2和ErbB4蛋白表达下调，而p53的表达上调，AKT的磷酸化水平则下降。结论：YAP过表达与PC9/Adr的耐药性相关，沉默YAP可恢复PC9/Adr对多柔比星的敏感性。这一作用与调节耐药相关基因的表达、促进细胞凋亡有关。

关键词：YAP、肺癌、多柔比星耐药

所属期刊栏目：26

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：492-498