PTP1B基因对人胃癌细胞株的增殖和迁移能力的影响

摘要：

背景与目的：胃癌是我国常见的消化道恶性肿瘤，术后易复发和转移。前期研究发现，蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B)基因与胃癌肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期有关。本研究通过RNA干扰技术和基因克隆技术分别沉默和上调胃癌细胞中PTP1B基因的表达，观察PTP1B基因对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法：将靶向沉默PTP1B基因的短发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)序列和克隆人的PTP1B cDNA基因序列分别转染MKN28和MKN45细胞，采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR，qRT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测转染后细胞中PTP1B基因和蛋白的表达水平，使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8，CCK-8)、Transwell迁移试验和划痕试验分别观察PTP1B基因对细胞增殖和迁移能力的影响。结果：转染shRNA后，MKN28细胞中PTP1B mRNA和蛋白表达量与空白对照组、阴性对照组相比抑制显著(P＜0.05)。CCK-8增殖活性实验显示，shRNA沉默PTP1B基因表达后能显著抑制胃癌MKN28细胞在48、72和96 h的增殖活性(P＜0.05)。Transwell迁移试验和划痕实验显示，PTP1B表达下调后胃癌MKN28细胞的迁移能力受到显著抑制(P＜0.05)。而提高PTP1B在MKN45细胞中表达后，细胞的增殖和迁移能力则显著提高(P＜0.05)。结论：PTP1B基因是胃癌细胞增殖和迁移的重要调控因子。

关键词：胃癌、蛋白酪氨酸磷酸酶1B、短发夹RNA、细胞增殖、细胞迁移

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：安徽省教育厅自然科学基金资助2011KJ193；芜湖市科技计划项目资助2012hm29-1;安徽省自然科学基金1508085MH147。

在线出版日期：2015-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：579-587