沙门菌黏合素SafD基因的克隆表达及纯化

摘要：

目的:建立并分析获得足量的沙门菌黏合素SafD蛋白的方法,以用于相关的结构、功能及应用研究.方法:通过分子克隆技术分别构建原核表达质粒SafD(31-156)+pet 15b和SafD(31-156)-DSC+pet15b,将测序正确的重组质粒转化到大肠埃希菌BL21,用异丙基硫代半乳糖苷进行诱导表达,并利用蛋白纯化技术纯化蛋白.结果:SafD(31-156)+pet15b重组克隆所表达的蛋白降解,该克隆在后续的研究中不可用;而SafD(31-156)-DSC+pet 15b重组克隆所表达的蛋白很稳定,经纯化得到纯度约为95％的目的蛋白,蛋白量约为1 mg/L,可用于后续的结构、功能及应用研究.结论:利用大肠埃希菌BL21细胞表达并纯化了重组沙门菌黏合素SafD蛋白,为进一步研究SafD的结构和功能奠定了基础.

关键词：沙门菌、菌毛、克隆、纯化、诊断试剂盒

所属期刊栏目：13

分类号：R378.2+2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金81370620

在线出版日期：2015-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：616-619