miR-203调控NEDD9抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭及迁移作用机制研究

摘要：

目的:研究miR-203抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞NEDD9蛋白的作用对细胞侵袭和迁移的影响.方法:miR-203脂质体转染MDA-MB-231细胞,通过细胞划痕实验和Transwell实验观察细胞侵袭和迁移能力的变化;通过蛋白印迹检测miR-203对NEDD9表达的调控作用,并用sensor reporter确定miR-203的靶标位点;最后,通过细胞“拯救”实验研究相关蛋白表达量的变化,用免疫荧光-激光共聚焦显微镜观察细胞片状伪足和黏着斑的改变,探究miR-203对MDA-MB-231细胞侵袭和迁移能力的调节机制.结果:细胞划痕实验和Transwell实验显示,miR-203抑制了MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力;通过生物信息学网站预测miR-203的靶基因是NEDD9;蛋白印迹和sensor reporter检测结果显示,miR-203通过与NEDD9 3'-UTR结合,下调NEDD9;共转染siNEDD9和miR-203的“拯救”实验后的细胞划痕实验、蛋白印迹和免疫荧光-激光共聚焦结果显示,miR-203抑制NEDD9表达导致激活态Rac1-GTP减少,致使细胞运动状态改变,侵袭迁移能力减弱,而siNEDD9干涉作用能“拯救”miR-203对MDA-MB-231细胞迁移能力的抑制.结论:miR-203通过降解NEDD9,下调激活的Rac1水平,导致乳腺癌细胞MDA-MB-231片状伪足和黏着斑的减少或消失,从而抑制细胞的侵袭及迁移.

关键词：miR-203、NEDD9、乳腺癌、侵袭、迁移

所属期刊栏目：13

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2014-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：505-510