黄酮联合阿霉素协同诱导HL60/ADR细胞凋亡机制的研究

摘要：

目的：探究黄酮在体外对多药耐药细胞系HL60/ADR的影响及联合阿霉素后对细胞生长抑制和凋亡的作用机制，探讨中药在白血病化疗中扶正、增效的可能性。方法：用CCK-8法检测黄酮和阿霉素对HL60/ADR细胞生长的抑制作用；用流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡率，并在光镜下观察细胞形态变化；蛋白印迹法检测药物作用后凋亡信号通路蛋白表达的情况；流式细胞仪检测药物作用后HL60/ADR线粒体跨膜电位的变化。结果：黄酮能显著抑制HL60/ADR细胞的增殖，且其抑制细胞增殖效应呈现浓度-时间依赖性；不同浓度的黄酮及联合阿霉素1.5μg/mL(20%抑制浓度即IC20值)后对细胞的抑制作用更明显，具有协同和相加作用。75μg/mL和100μg/mL黄酮能促进HL60/ADR细胞凋亡，而黄酮联合阿霉素的促凋亡作用更显著。蛋白信号通路研究显示，单药黄酮及两药联合能使HL60/ADR细胞线粒体膜电位下降，抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL表达明显下调，促凋亡蛋白Bim、Bad、Bax明显增加，激活caspase途径；同时磷酸化的P-JNK蛋白表达水平升高，而P-ERK明显下降。结论：黄酮联合阿霉素可通过线粒体跨膜电位的下降，依赖caspase活化调控Bcl-2家族中Bim、Bad和Bax蛋白表达，下调ERK细胞保护通路并上调JNK应激相关通路，最终协同抑制HL60/ADR细胞增殖并诱导其凋亡。

关键词：黄酮、阿霉素、凋亡、HL60/ADR细胞

分类号：R733.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学青年基金81300405；上海市卫生局重大课题ZYSNXD-CC-ZDYJ001；上海市科委中医引导项目12401906700

在线出版日期：2014-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：159-165