10.3969/j.issn.1673-6087.2013.05.010
氯化钴诱导心肌细胞化学性缺氧HIF-1α表达的研究
目的:观察不同浓度的氯化钴(CoCl2)对H9C2心肌细胞的影响及其诱导化学性缺氧的最佳浓度和时间.方法:用100、300、600、900、1 200 μmol/L的CoCl2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型,分别于12、18、24、36、48 h用Hoechst 33342细胞核染色法检测心肌细胞凋亡;CCK-8试剂盒检测心肌细胞存活率;确定最佳诱导浓度600 μmol/L后,分别于0、3、6、9、12、18、24、36、48 h采用蛋白印迹法检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白的表达;确定最佳诱导时间后,用蛋白印迹法检测100、300、600、900、1 200tμmol/LCoCl,处理H9C2心肌细胞12h后HIF-1α蛋白的表达情况.结果:在600~1 200 μmol/L浓度范围内,CoCl2呈剂量依赖性地抑制H9C2心肌细胞的存活.600 μmol/L CoCl,诱导12 h后H9C2心肌细胞产生明显凋亡,诱导12~48 h范围内,12 h时H9C2心肌细胞表达的HIF-1α蛋白最高;100~1 200 μmol/L CoCl2诱导H9C2心肌细胞12 h,其中600 μmol/LCoCl,诱导时H9C2心肌细胞表达的HIF-1α蛋白最高.结论:CoCl2诱导H9C2心肌细胞化学性缺氧的最佳浓度为600 μmol/L,此时最佳时间为12 h.
氯化钴、化学性缺氧、缺氧诱导因子1α、H9C2心肌细胞
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R445.9(诊断学)
上海市科技人才计划项目11XD1403700;瑞金医院学科带头人攀登计划
2013-12-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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