免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌方法的建立

摘要：

目的:建立一种基于免疫磁性微球富集的检测结核分枝杆菌的新方法,以提高其临床阳性检出率.方法:提取结核分枝杆菌H37Rv抗原,并免疫新西兰白兔,制备兔抗结核分枝杆菌H37Rv血清.分离纯化抗血清,采用酶联免疫吸附试验和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴定抗体的效价和纯度.将抗结核分枝杆菌抗体与生物素标记,并与结合有链霉亲和素的磁性微球进行连接获得免疫磁性微球,优化反应条件,建立免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌的方法.以培养结果作为判断金标准,比较免疫磁性微球富集方法与常规涂片镜检方法的检出率.结果:制备的抗结核分枝杆菌抗体浓度为14 mg/mL.最终效价为1:20 000.检测158例临床标本,免疫磁性微球富集方法可使涂片镜检阳性率从5.1％提高到13.9％.22例免疫磁性微球富集后涂片镜检阳性的标本培养均为阳性,其特异度为100％.结论:建立的免疫磁性微球富集方法简便、有效,能显著提高结核分枝杆菌镜检的灵敏度和特异度.

关键词：结核分枝杆菌、免疫磁性微球、磁性分离富集、涂片镜检、培养

所属期刊栏目：11

分类号：R521(结核病)

资助基金：上海市科委10411965800;上海申康医院发展中心SHDC12010215

在线出版日期：2013-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：476-480