人端粒酶反转录酶启动子调控人钠碘同向转运体基因肿瘤靶向治疗的实验研究

摘要：

目的:探讨肿瘤特异性人端粒酶反转录酶(hTERT)启动子调控的人钠碘同向转运体(hNIS)的特异性抗肿瘤作用.方法:将质粒pcDNA3.1-CMV-hNIS中的hNIS cDNA亚克隆至含hTERT核心启动子的质粒载体pGL3-hTERT-luc中,以构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,并以质粒pGL3-hTERT-luc及pcDNA3.1-CMV-hNIS分别作为阴性对照及阳性对照,然后采用脂质体将其转染至人胚肺成纤维细胞MRC-5及肿瘤细胞HeLa、A549和U87中,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测hNIS mRNA水平；免疫细胞化学法及流式细胞术(FCM)检测hNIS蛋白的表达情况；摄碘实验验证hNIS蛋白的功能；同时采用MTT观察131I的细胞杀伤作用.结果:成功构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,转染4种细胞后,3种肿瘤细胞的hNIS mRNA水平明显高于MRC-5细胞(P＜0.05).3种肿瘤细胞均可表达hNIS蛋白,而MRC-5细胞不表达.与Na125I孵育30 min时HeLa、A549和U87细胞的摄碘量分别是阴性对照组的25倍、20倍和18倍.131I照射7h后,3种肿瘤细胞的相对存活率显著下降(P＜0.05).结论:hTERT启动子调控hNIS基因在肿瘤细胞中特异性表达,这些细胞可特异性摄碘并被其有效杀伤,为行进一步体内实验奠定基础.

关键词：人钠碘同向转运体、人端粒酶反转录酶(hTERT)、核心启动子、基因治疗

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分类号：R730.44(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81071181;上海市卫生局青年基金2010Y021;上海交通大学医学院校基金YZ1071

在线出版日期：2012-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：354-360