携带绿色荧光蛋白基因慢病毒转染的大鼠骨髓间充质干细胞的干细胞特性检测

摘要：

目的:研究携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的慢病毒转染的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是否仍具有干细胞的特性.方法:培养大鼠骨髓MSC,采用携带GFP基因的慢病毒转染MSC.用不同感染复数(multiplicity of infection,MOI,分别设定为5、10、25、50)转染MSC,在荧光显微镜下观察转染效果,流式细胞仪测定最佳MOI的转染效率和携带GFP的MSC (MSC-GFP)表面抗原CD表型,采用成脂肪、成骨、成软骨分化液诱导MSC-GFP分化,荧光显微镜和化学染色观察诱导分化结果.结果:MOI=25时细胞死亡少,转染效果最佳,转染效率为97％.MSC-GFP不表达CD11b/c(2％)、CD45(3％),表达CD29(100％)、CD90(99％),可向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化,符合干细胞特性.结论:携带GFP基因的慢病毒转染的骨髓MSC维持着干细胞特性.本研究结果为MSC在体内示踪研究提供理论基础.

关键词：间充质干细胞、绿色荧光蛋白、慢病毒载体、机制

所属期刊栏目：10

分类号：R446.8(诊断学)

资助基金：上海市科委基础研究重点项目09JC1410700

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：527-530