MYCN转基因斑马鱼对造血调控因子的影响

摘要：

目的:通过热激活启动子条件性过表达鼠源性MYCN基因,建立生殖系稳定转染的斑马鱼系.以研究MYCN基因对造血调控因子转录的影响.方法:构建携绿色荧光蛋白"报告基因"的MYCN质粒.显微注射到斑马鱼胚胎单细胞期,通过荧光筛选出FO代,继而建立生殖系稳定转染的转基因鱼系.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)血涂片论证MYCN基因的过表达及其对造血调控因子的影响.结果:在256条嵌合表达的性成熟阳代斑马鱼中,鉴定发现有18条(7.0%)1显示转基因阳性,其中雄鱼8条,雌鱼10条.同时,RFQ-PCR及外周血涂片均显示,转基因斑马鱼F1和F2代均发生明显的造血分化障碍,造血关键调控因子scl、mpo、gatal基因表达量明显下降.结论:斑马鱼在基因研究中具有直观及规模化优势.特别适用于单一基因的研究,MYCN基因产物可显著抑制红系生成和造血分化.

关键词：斑马鱼、MYCN基因、造血调控因子

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分类号：R318.12(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金30900636;上海市科委基础研究重点项目08JC1414900

在线出版日期：2011-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：122-127