左归降糖解郁方改善糖尿病并发抑郁症大鼠N-甲基D-天冬氨酸受体过激致海马突触损伤的作用机制

摘要：

目的 研究左归降糖解郁方通过调节引哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenasel,IDO)信号抑制糖尿病并发抑郁症大鼠海马N-甲基D-天冬氨酸受体(N-methyl D-aspartatereceptor,NR)过激致海马突触损伤的作用机制.方法 建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为空白组、模型组、IDO抑制剂(3mg/kg)组、左归降糖解郁方(20.52g/kg)组和阳性对照(二甲双胍0.18g/kg+氟西汀1.8mg/kg)组.各组大鼠ig给药28d后,采用旷场实验、强迫游泳实验和Morris水迷宫检测大鼠抑郁样行为和记忆认知功能;采用Western blotting和qRT-PCR检测海马IDO蛋白和基因表达;采用ELISA试剂盒检测血清和海马中γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、CC族趋化因子配体2(CC chemokineligand2,CCL2)、色氨酸、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸(kynurenine acid,KA)、喹啉酸、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-a(tumornecrosis factor-α,TNF-α)和IL-6水平;采用免疫荧光法检测海马中离子钙接头蛋白-1(ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba-1)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、突触素(synaptophysin,Syn)、突触后致密蛋白-95(post synaptic density protein-95,PSD-95)的表达;采用 Western blotting 检测海马中腺苷 A1R 受体(adenosine Al receptor,A1R)、腺苷 A2AR 受体(adenosine A2A receptor,A2AR)、腺苷 A3R 受体(adenosine A3 receptor,A3R)、N-甲基 D-天冬氨酸受体 2A(N-methyl D-aspartate receptor 2A,NR2A)、N-甲基 D-天冬氨酸受体 2B(N-methyl D-aspartate receptor 2B,NR2B)和脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白表达;采用苏木素-伊红染色、Nissl染色和TUNEL法检测海马病理损伤及凋亡情况.结果 左归降糖解郁方能显著降低模型大鼠血糖水平(P＜0.01),并改善抑郁样行为,表现为旷场实验总距离和中心时间显著增加(P＜0.01)、强迫游泳不动时间显著缩短(P＜0.01)、Morris水迷宫实验定位巡航时间显著降低(P＜0.05)和空间探索时间显著增加(P＜0.01).左归降糖解郁方组和IDO抑制剂均能通过显著下调IDO蛋白和基因表达(P＜0.001),并不同程度降低IFN-γ、CCL2、犬尿氨酸、喹啉酸水平(P＜0.05、0.01),逆转色氨酸-犬尿氨酸代谢紊乱;同时显著抑制Iba-1、GFAP表达(P＜0.05、0.01),并降低IL-1β、TNF-a、IL-6水平(P＜0.05、0.01),抑制体内炎症水平;进而降低A2AR、NR2A、NR2B蛋白表达(P＜0.05、0.01),增加A1R、A3R蛋白表达(P＜0.05),改善NR过度激活;最终提高Syn、PSD-95、BDNF表达(P＜0.05),显著改善海马病理损伤及降低神经元凋亡(P＜0.05、0.01),对海马突触损伤和神经元产生保护作用.结论 左归降糖解郁方通过抑制IDO水平,调节糖尿病并发抑郁症大鼠海马色氨酸-犬尿氨酸代谢通路,从而改善NR过激致海马突触损伤,发挥抗抑郁作用.

关键词：左归降糖解郁方、糖尿病并发抑郁症、吲哚胺-2、3-双加氧酶、色氨酸-犬尿氨酸代谢通路、海马突触损伤、马钱苷、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、金丝桃苷、姜黄素、丹酚酸B

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;湖南省科药联合基金资助项目;湖南省科药联合基金资助项目;湖南省中医药管理局科研课题

在线出版日期：2023-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：6323-6335