半夏曲中4种优势微生物的荧光定量PCR方法的建立

摘要：

目的 对半夏曲中4种优势微生物建立快速、有效的荧光定量PCR检测方法.方法 以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、宛氏拟青霉Paecilomyces variotii、丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis、黑曲霉Aspergillus niger的重组质粒为标准质粒,设计特异性引物并进行特异性、灵敏性及重复性实验.结果 4种优势微生物的熔解曲线峰单一.枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的最低检测限度分别为584、622、0.272、500拷贝/μL.不同质量浓度的标准质粒变异系数(CV)均小于5％.结论 建立的枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的荧光定量PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,可用于发酵类中药中微生物的检测及定量.

关键词：枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉、荧光定量PCR、SYBR GreenⅠ

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分类号：R286(中药学)

资助基金：国家中医药管理局2015年中医药行业科研专项201507004-03

在线出版日期：2018-02-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：5130-5135