红花天冬氨酸激酶基因片段的分离及表达分析

摘要：

目的 克隆红花种子中的天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)基因并研究其在种子不同发育时期的表达量.方法 根据红花转录组文库注释信息筛选与红花天冬氨酸激酶(CtAK)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花种子总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增CtAK基因片段并连接到克隆载体上,经PCR及酶切鉴定,筛选阳性克隆进行测序.同时利用荧光定量PCR技术对其进行基因表达量的分析.结果 克隆了红花CtAK基因的核心片段,分离到486 bp的基因序列.根据CtAK基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行荧光定量PCR分析,CtAK基因在红花品种川红1号初花后13d表达量最高.结论 系统发育树分析表明,该基因与其他物种的AK基因具有较高的同源性.

关键词：红花、天冬氨酸激酶、基因克隆、同源性、基因表达

所属期刊栏目：46

分类号：R282.12(中药学)

资助基金：国家高技术研究发展计划"863" 2011AA100606;国家自然科学基金资助项目31401445;吉林省科技厅医药产业推进计划项目20140311034YY;教育部博士点基金20122223120002

在线出版日期：2015-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3065-3070