基于同位素标记相对和绝对定量技术的联合用药抗肝纤维化作用的蛋白质组学研究

摘要：

目的 以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、牛磺酸和染料木素3种具有不同抗纤维化作用的药物组成联合用药,应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术研究联合用药对肝纤维化大鼠治疗作用的蛋白质基础及分子机制.方法 将SD大鼠分为对照组、模型组和联合用药组,模型组和联合用药组大鼠分别ig 50％ CCl4溶液,对照组给予花生油,连续14周.于第9周开始联合用药组进行ig给药(牛磺酸200 mg/kg+EGCG 30 mg/kg+染料木素20 mg/kg)治疗,连续6周.采集大鼠血清和肝组织样本,肝组织进行HE染色观察病理变化,模型组和联合用药组血清样本组内等量混合后去除高丰度蛋白,iTRAQ试剂标记后应用液相色谱分离,经质谱鉴定,进行相对定量及生物信息学分析,用ELISA法对有代表性的血清差异蛋白Txnl进行验证.结果 质谱鉴定出置信度在95％以上的蛋白质共359个,其中差异表达的蛋白有78种,上调的蛋白有51种,下调的有27种.与模型组相比,差异蛋白Txn1在联合用药组血清中的量明显升高(P＜0.05).结论 联合用药能通过对多个蛋白质、多途径的综合调节达到抗肝纤维化的效果,其中对抗氧化防御系统和血液凝固级联活化途径的调节可能是联合用药抗肝纤维化作用的分子机制.

关键词：联合用药、同位素标记相对和绝对定量、蛋白质组学、肝纤维化、表没食子儿茶素没食子酸酯、牛磺酸、染料木素

所属期刊栏目：46

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81160063,81360192;广西自然科学基金项目2013GXNSFBA019167,2012GXNSFCA053004;广西区域性高发肿瘤早期防治研究重点实验室基金GK2013-13-A-01-03

在线出版日期：2015-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：73-79