黄花蒿HDS基因的克隆与功能分析

摘要：

目的 克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因(HDS),并进行生物信息学分析和功能互补分析研究.方法 对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对,选取保守区域设计简并引物,利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因；利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,并用MEGA3.0中的临位相联法构建进化树.结果 得到1条长2324 bp的HDS cDNA序列,其ORF 框长1854 bp,编码617个氨基酸残基的蛋白；生物信息学分析显示,黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源;功能互补分析表明,AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara＜＞ HDS中缺失的HDS功能,使突变菌株恢复生长,证明AaHDS具有典型的HDS基因功能.结论 首次克隆获得黄花蒿HDS基因,为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础.

关键词：黄花蒿、羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因、基因克隆、生物信息学分析、青蒿素

所属期刊栏目：43

分类号：R282.21(中药学)

资助基金：重庆市教委自然科学研究资助项目kj071204

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：148-154