核酸内切酶制备的siRNA抑制HBV基因表达和复制

摘要：

目的:研究核酸内切酶制备的siRNA(esiRNA)对HBV基因表达和复制的抑制作用.方法:利用分子生物学方法制备了分别针对HBV S基因和C基因的esiRNA(SesiRNA、CesiRNA),与HBV复制型质粒pHY106+ wta共转染HepG2细胞,化学发光微粒免疫分析方法检测细胞培养上清中的HBsAg和HBeAg,Northern和Southern印迹检测HBV的mRNA和病毒复制中间体水平.结果:EsiRNA特异抑制HBV基因表达和复制,呈剂量依赖性.在工作浓度为100 nM时,SesiRNA和CesiRNA分别抑制细胞培养上清中75.96％和68.09％的HBsAg,79.69％和78.40％的HBeAg,降低细胞内60％和58％的HBV mRNA,抑制90％和87％的HBV病毒复制中间体.而且SeciRNA对于多种HHsAg自然突变体的表达均有抑制作用.结论:EsiRNA可以有效抑制HBV的基因表达和病毒复制,尤其对于HBV的不同基因型/亚型和准种可以发挥广谱效应.

关键词：乙型肝炎病毒、RNA干扰、小干扰性RNA、核酸内切酶制备的siRNA

所属期刊栏目：31

分类号：Q783.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省自然科学基金2010CDZ036;湖北医药学院优秀中青年科技创新团队项目2011CXX02

在线出版日期：2013-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：453-457