应用降落PCR及克隆测序检测2型糖尿病外周血白细胞胰岛素样生长因子受体IGF1R基因甲基化

摘要：

目的:比较应用降落PCR(TD-PCR)及克隆测序检测2型糖尿病患者外周血白细胞中胰岛素样生长因子受体( IGF1 R)基因启动子区DNA甲基化位点的方法.方法:提取2型糖尿病患者外周血白细胞DNA进行亚硫酸氢盐处理,设计引物扩增IGF1R基因启动子区富含CG位点序列,分别行普通PCR和TD-PCR扩增,对含目的条带产物进行直接测序和克隆后测序.结果:与普通PCR扩增结果相比,TD-PCR扩增条带清晰、产物量多、二聚体少;且TD-PCR减少了对退火温度不断摸索的过程.克隆后测序峰图清晰,碱基丢失错判频率减少.结论:推荐应用TD-PCR检测亚硫酸氢盐处理的DNA甲基化位点,并进行克隆后测序.

关键词：甲基化、降落PCR、胰岛素样生长因子1受体、2型糖尿病、测序

所属期刊栏目：30

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：湖北医药学院博士启动金2010QDJ22

在线出版日期：2012-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：557-560