脂质体介导10-23脱氧核酶对人血管平滑肌细胞增殖的影响

摘要：

目的:研究针对增殖细胞核抗原(PCNA)基因特异性的10-23脱氧核酶(DNAzyme)对人血管平滑肌细胞(VSMC)PCNA的表达和细胞增殖的影响.方法:应用脂质体转染法将不同寡聚核苷酸转入体外培养的人脐动脉VSMC.采用3H-TdR掺入法观察空白对照组、脂质体组和等摩尔浓度(1.0 μmol/L)的DNAzyme、反义寡核苷酸(ASODN)、mDNAzyme在干预2 d后VSMC的DNA合成速率;免疫组化检测1.0 μmol/L的DNAzyme和ASODN转染2 d后对PCNA表达的影响;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析不同剂量的DNAzyme(0.125、0.25、0.5、1.0、2.0 μmol/L)转染5 d后VSMC增殖活性.结果: 1.0 μmol/L DNAzyme和ASODN转染2 d后,VSMC的3H-TdR掺入量均较对照组显著减低(P<0.05), DNAzyme较ASODN更显著减低(P<0.05);1.0 μmol/L DNAzyme作用2 d后细胞增殖抑制率为64.5%,高于ASODN组(37.7%)、mDNAzyme组(11.9%)和脂质体组(3.3%).DNAzyme和ASODN处理细胞2d后,PCNA的表达水平(平均光密度值)分别为0.2956±0.0251和0.3880 ±0.0925,明显低于空白对照组0.7342±0.2136(P<0.01).转染5 d后,DNAzyme的作用呈剂量依赖性,0.125 μmol/L DNAzyme处理后VSMC的增殖较对照组低(P<0.05).结论:针对PCNA的10-23 DNAzyme可抑制培养细胞PCNA的表达,有效阻止VSMC细胞增殖.

关键词：脱氧核酶、增殖细胞核抗原、肌、平滑、血管、增殖

所属期刊栏目：23

分类号：R543(心脏、血管（循环系）疾病)

在线出版日期：2005-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：266-269