抗突变型p53 Maxizyme的体外转录和真核表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的:构建抗突变型p53 Maxizyme(Mz)的体外转录和真核表达载体,为进一步探讨抗p53 Mz的体外切割作用和在细胞内对突变型p53的抑制作用打下了基础.方法:应用计算机设计针对肝癌细胞突变型p53(mtp53)249位密码子的Mz的基因片断(MzL和MzR),分别克隆入体外转录载体pBSKU6中,命名为pU6-MzL和pU6MzR.应用PCR技术使pU6-MzR的酶切位点改变,亚克隆入pU6-MzL中,重组质粒命名为pU6-Mz,同时构建靶基因mtp53的体外转录质粒.再将嵌U6中的Mz亚克隆入真核表达载体pEGFP中,构建真核重组质粒pEGFP-Mz,该质粒嵌于U6表达系统中,在体外由RNA聚合酶Ⅲ高效转录.结果:测序结果提示成功构建了Mz的体外转录和真核表达载体.结论:本研究成功构建了针对突变型 p53的Maxizyme的体外转录和真核表达载体,为进一步的体外实验和细胞内的研究打下了基础.

关键词：Maxizyme、肝肿瘤、突变型p53

所属期刊栏目：22

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30171061

在线出版日期：2003-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：70-72