10.3969/j.issn.1006-9674.2000.02.001
卵母细胞基因表达系统的应用研究
目的:建立研究神经生理及药理的卵母细胞表达模型,并对鸡脑mRNA在卵母细胞上表达的氨基酸类受体进行研究.方法:采用盐酸胍或异硫氰酸胍法抽提总RNA,经寡聚脱氧胸苷(oligo-dT)纤维素柱纯化得mRNA.mRNA微注射到卵母细胞内进行表达,以双电极电压钳技术研究表达的受体.结果:模型能明显表达外源性mRNA表达的受体,而阴性对照无表达.在卵母细胞膜上表达的γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA),甘氨酸(Glycine,Gly)及红藻氨酸(Kainate,KA)受体,施加GABA,Gly及KA均能引起一剂量依赖的内向电流,相应的拮抗剂可阻断其电流.剂量效应曲线显示GADA及KA诱导电流的半有效浓度(EC50)分别为2.9×10-5mol/L及6.3×10-5mol/L.结论:卵母细胞可明显表达鸡脑mRNA编码的KA,Gly及GABA受体,其药理特性与天然受体相似,是一个良好的神经生理及药理研究模型.
RNA、信使、受体、GABA-A、甘氨酸、红藻氨酸、爪蟾属
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Q813.6(生物工程学(生物技术))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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