柑橘愈伤组织RNAi沉默CCD1基因对其类胡萝卜素积累的影响

摘要：

类胡萝卜素裂解双加氧酶(CCD)可催化类胡萝卜素在特定位点氧化裂解生成多种生物活性化合物,其活性差异一定程度上决定了植物体内类胡萝卜素含量和组成变化.为了探讨柑橘中CCD1蛋白对类胡萝卜素积累的影响,从红肉脐橙(Citrus sinensis L.Osbeck)果实中克隆了CCD1基因,将其特异片段通过重组反应连接到pHGRV载体中,构建CCD1的RNA干扰载体pHGRV-CCD1.利用农杆菌介导的方法将其转入'国庆1号'蜜柑、'伏令夏橙'和'马叙'葡萄柚愈伤组织中,经PCR鉴定分别获得6、4、4个转基因干扰系.3种柑橘材料转基因干扰系中CCD1基因的表达水平均较野生型显著下调,其中'马叙'葡萄柚转基因干扰系Rm2的表达水平仅为野生型的8.4％,干扰效果最佳.CCD1转基因干扰系愈伤组织外观多数呈现与野生型对照相近的色泽,仅Rm2系可见较为明显的颜色变化;综合分析3种柑橘材料转基因前后类胡萝卜素含量变化,发现CCD1基因抑制表达后,紫黄质、9-顺式-紫黄质的含量均较野生型显著增加,表明其可能是CCD1在柑橘愈伤组织体内优先选择的裂解底物.

关键词：柑橘、类胡萝卜素、类胡萝卜素裂解双加氧酶、RNAi技术、愈伤组织

所属期刊栏目：47

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：国家重点研发计划项目;国家自然科学基金项目

在线出版日期：2020-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1982-1990