利用CRISPR/Cas9系统敲除葡萄中VviEDR2提高对白粉病的抗性

摘要：

利用CRISPR/Cas9系统定点编辑葡萄白粉病感病基因VviEDR2 (Enhanced disease resistance 2),在VviEDR2的DUF1336结构域设计靶位点VviEDR2-T1,构建CRISPR/Cas9敲除载体,通过农杆菌介导法转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织.对PCR阳性植株进行靶位点扩增测序,结果表明,共有8个转基因植株在靶位点处发生不同类型的双等位基因突变,编辑效率为32％;突变体植株生长势较弱,叶片较小,茎秆丛生、细弱.进一步对突变体植株进行抗病检测,结果表明,接种葡萄白粉菌(Erysiphe necator Schw.)5 d后,突变体植株叶片上白粉菌孢子仅能萌发出少量较短初级菌丝,表皮细胞产生大量明显的H2O2,而野生型叶片中白粉菌萌发出大量初级菌丝、次级菌丝和吸器,无明显H2O2产生.这些结果表明,可以利用CRISPR/Cas9技术编辑葡萄感病基因VviEDR2,提高葡萄白粉菌抗性.

关键词：葡萄、CRISPR/Cas9、基因编辑、VviEDR2、白粉菌

所属期刊栏目：47

分类号：S663.1(果树园艺)

资助基金：国家重点研发计划项目;国家自然科学基金项目

在线出版日期：2020-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：623-634