10.16420/j.issn.0513-353x.2019-0147
甘蓝BoMLPKn1的克隆及其拟南芥同源基因AtAPK1b的功能研究
在克隆甘蓝BoMLPK编码序列过程中,获得BoMLPKf1/2编码序列和1个新的转录文本(命名为BoMLPKn1).BoMLPKf1/2和BoMLPKn1的cDNA大小分别为1 215、1 233和1 257 bp,分别编码含404、410和418个氨基酸残基的多肽链.与BoMLPKf1/2相比,BoMLPKn1有两个插入序列,一个是在1 102～1 114bp之间有12个碱基的插入,另一个是在1152～1182bp之间有30个碱基的插入.BoMLPKf1/2定位在甘蓝3号染色体上,BoMLPKn1定位在4号染色体上.氨基酸序列比对发现,BoMLPKf1和BoMLPKn1的N端均含典型的豆蔻酰化基序,BoMLPKf2的N端含疏水结构域.3个转录文本均具有1个高度保守的Ser/Thr蛋白激酶结构域.RT-PCR检测发现自交不亲和甘蓝自花授粉15 min后BoMLPKf2相对表达量急剧升高,BoMLPKf1和BoMLPKn1在自花授粉15 min后相对表达量无明显变化.亚细胞定位检测到BoMLPKn1定位在细胞膜上.利用CRISPR-Cas9植物编辑系统对Bo MLPKn1拟南芥直系同源基因AtAPK1n基因组进行定点敲除,获得突变体植株.与野生型相比,突变体植株均能够正常开花结籽.结果 表明ML Kn1基因在整个十字花科进化中是高度保守的,不参与自交不亲和反应,这与MLPKf1/2不同.
甘蓝、M-位点受体激酶、基因克隆、表达分析、亚细胞定位、基因编辑
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S635(蔬菜园艺)
国家重点基础研究发展计划‘973’计划项目2012CB113900;国家自然科学基金项目30900986,31572127;重庆市自然科学基金重点项目cstc2012jjB80010
2020-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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