马铃薯栽培品种‘合作88’细菌人工染色体文库的构建与评价

摘要：

以四倍体马铃薯栽培品种‘合作88’培养12～15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100～300kb片段,连接到载体CopyControlTMpCC1BACTM的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库.该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08％,保存在1 700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍.随机挑取6个BAC克隆连续培养5d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性.BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础.

关键词：马铃薯、细菌人工染色体文库、抗病性

所属期刊栏目：42

分类号：S532(薯类作物)

资助基金：国家‘863’计划项目2013AA102603-4;国家科技支撑计划项目2012BAD02B05-10;山东省良种工程农业生物资源创新利用项目PTBR2013;公益性行业农业科研专项201303018-03;山东省农业科学院青年科研基金项目2014QNZ03

在线出版日期：2015-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：361-366