马铃薯5种病毒多重PCR检测技术的建立及应用

摘要：

采用多重RT-PCR方法,建立可同时检测马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯M病毒(PVM)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯A病毒(PVA)和马铃薯S病毒(PVS)的方法.根据GenBank中PVX、PVM、PVY、PVA及PVS (CP)基因序列设计特异引物,对多重RT-PCR退火温度、循环次数、延伸温度、引物组合浓度进行优化,建立了能同时检测5种马铃薯病毒的多重RT-PCR方法.该方法能同时扩增出PVX、PVM、PVY、PVA及PVS特异片段,其大小分别是138、213、369、468和657 bp.测序结果表明,5种病毒的序列与相应参考序列相似性达到97％以上.灵敏度分析结果表明,多重RT-PCR方法能够检测植物组织量为103 mg.应用建立的多重RT-PCR检测方法对田间样品和组培苗进行检测,结果显示,该方法可以准确、快速、灵敏地同时检测单一或复合侵染的5种马铃薯病毒.

关键词：马铃薯、病毒、检测方法、多重RT-PCR

所属期刊栏目：42

分类号：S532(薯类作物)

资助基金：国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目CARS-10;福建省财政专项——福建省农业科学院科技创新团队项目CXTD-1-1301

在线出版日期：2015-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：280-288