紫红线茄转基因体系优化及SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化

摘要：

建立了以紫红线茄下胚轴为外植体的高效转基因体系.利用该方法,以获得茄子 SmARF8基因RNA干涉转基因植株为目的,构建了以NPTⅡ基因为筛选标记的融合表达载体pCAMBIAI35S-2300-SmARF8-INT,并通过农杆菌介导,侵染茄子下胚轴外植体.含有2 mg· L-1吲哚乙酸,0.5 mg· L-1玉米素,25 mg· L-1卡那霉素和500 mg.L-1头孢氨苄的MS选择培养基可直接诱导外植体产生转基因分化苗,再生率达到80％.转基因苗继续生长并在不含激素的MS培养基上产生健壮根系,最终获得转基因株系.RT-PCR和qRT-PCR分析验证了T0代转基因株系中内源基因SmARF8被干涉后不表达或表达量降低,Southern blot分析显示选择的T0代转基因株系中存在1个T-DNA插入拷贝.以上研究结果表明利用建立的转基因体系SmARF8基因在茄子中被成功敲除.

关键词：茄子、转基因、RNA干涉、农杆菌

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分类号：S641.1

在线出版日期：2014-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1105-1114