葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达

摘要：

葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布.采集10株'藤稔'葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现,10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒.以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT-PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因(CP),该基因全长597 bp.将其与GenBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树,把不同地理起源的GVA分离物分成两个变异组,其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%～80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组(组内分离物具有84.4%～99.5%的序列同一性).构建了GVA CP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达.

关键词：葡萄、葡萄A病毒、ELISA、RT-PCR、外壳蛋白基因、原核表达

所属期刊栏目：35

分类号：S663.1(果树园艺)

资助基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划NET-0876;高等学校博士学科点专项科研项目20070610172;四川省科技攻关项目07KJT-08;四川省应用基础研究计划07JY029-068;四川大学校科研和教改项目XQ06039

在线出版日期：2008-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：967-972