小金海棠二价铁转运蛋白基因MxIRT1定点突变的研究

摘要：

采用PCR技术对小金海棠(Malus xiaojinensis)二价铁转运蛋白基因MxIRT1的定点突变体系进行了探讨.根据MxIRT1开放阅读框(ORF)两端和突变位点序列各设计一对引物.通过PCR扩增,获得带有突变位点且在突变位点相互重叠的两个PCR片段.对以上两个片段的浓度进行调整后,将其用作PCR反应的模板.对退火温度和延伸时间进行优化后,利用ORF两端引物,将带有突变位点的两个片段拼接起来,从而获得了含有所要突变位点的MxIRT1,并将其插入pEASY-T2载体中.DNA序列分析表明在预期位点上已经发生了突变:MxIRT1编码的第186位密码子已由组氨酸残基变为丙氨酸残基,证明用PCR技术已成功地使MxIRT1基因发生突变.整个突变过程不需要任何回收与纯化步骤,是一个高效、快捷的定点突变体系.

关键词：小金海棠、基因突变、定点突变技术、二价铁转运蛋白基因、缺铁病

所属期刊栏目：35

分类号：S665.2(果树园艺)

资助基金：北京市教委共建项目JD100190532

在线出版日期：2008-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：189-194