应用PCR及Nested-PCR技术检测柑橘黄龙病病原研究

摘要：

以采自田间和广东省农业科学院果树研究所防虫隔离网室内嫁接并感染黄龙病的5个柑橘品种叶片为材料,以草本指示植物长春花( Catharanthus roseas)和木本指示植物椪柑(Citrus reticulata Blanco)鉴定为基础,采用改良的CTAB法提取总DNA,在此基础上进行常规PCR与Nested-PCR检测,并对特异目的片段进行克隆、测序.试验证明Nested-PCR比常规PCR的灵敏度更高.这两种方法均可以检测出未显症的黄龙病材料,但Nested-PCR可以在木本指示植物嫁接后40 d左右、草本指示植物摩擦接种1个月左右检测到病原;而常规PCR在木本植物嫁接后60 d左右、草本植物摩擦接种近2个月左右才能检测到病原.常规PCR所能检测到的最低DNA的量为pg数量级;Nested-PCR检测病原DNA灵敏度约为常规PCR的104倍.

关键词：柑橘、黄龙病、PCR、Nested-PCR、检测

所属期刊栏目：31

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA241142;广东省科技攻关项目

在线出版日期：2005-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：803-806