牡蛎胰岛素相关多肽3克隆表达及纯化

摘要：

目的 克隆构建含有胰岛素相关多肽3(IRP3)基因的BL21表达菌株,并对表达蛋白进行分离纯化、鉴定和复性.方法 采用DNA重组技术克隆获得IRP3-pET30a阳性BL21菌株,双酶切后琼脂糖凝胶电泳显示IRP3-pET30a质粒构建成功,利用镍金属亲和层析方法获得IRP3/HIS纯化蛋白,进一步利用SDS-PAGE和Western blot技术确认IRP3/HIS融合蛋白的纯化效果.结果 成功克隆IRP3-pET30a质粒,筛选获得含有IRP3-pET30a质粒的BL21表达菌株.从包涵体裂解上清液中获得了纯化的IRP3/HIS融合蛋白并进行透析复性.结论 IRP3基因克隆成功及IRP3/HIS融合蛋白表达纯化,为IRP3蛋白的抗体制备和作为体外生长因子添加剂的应用打下基础.

关键词：胰岛素相关多肽3;基因克隆;表达;纯化

所属期刊栏目：18

分类号：R745(神经病学与精神病学)

资助基金：福建省教育厅中青年教师教育科研项目;厦门医学院校级课题;厦门医学院校级科研计划项目;厦门医学院大学生创新创业训练项目

在线出版日期：2022-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：19-22