异氟烷预处理对缺氧/复氧引起的心肌细胞损伤的影响
目的 探讨异氟烷(Iso)在缺氧/复氧(A/R)诱导的心肌细胞损伤中的影响及其作用机制.方法 培养心肌细胞H9e2,用不同浓度的Iso(1%、2%、3%)预处理后进行3h的缺氧和3h的复氧.MTT检测细胞生长,筛选Iso使用浓度,随后实时定量PCR检测miR-499表达.在3% Iso预处理的A/R损伤心肌细胞中转染miR-499的过表达试剂miR-499 mimic,流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2的蛋白表达;试剂盒检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和谷氨酸氨基转移酶(ALT)的含量.结果 与Control组比较,A/R组的细胞活力显著下降(P<0.05),同时Iso预处理剂量依赖性的诱导细胞活力增加,由而筛选出3%作为Iso预处理浓度.与Control组比较,miR-499的表达在A/R组中显著提升(P<0.05),并在3% Iso预处理心肌细胞(Iso组)中下降(P<0.05).与Control组比较,A/R组的细胞生长显著降低(P<0.05),细胞凋亡升高(P<0.05),促凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、Bax表达升高(P<0.05),抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.05),LDH、CK和ALT的含量明显升高(P<0.05).Iso预处理抑制以上由A/R诱导的H9c2细胞损伤,并且此心肌细胞保护作用可被miR-499过表达反转.结论 Iso可以通过抑制miR-499表达减轻A/R引起的心肌细胞损伤.
异氟烷、miR-499、心肌细胞、缺氧/复氧
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R972(药品)
中央军委后勤保障部军队后勤科研计划项目CCD16J001
2018-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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