慢病毒靶向携带Akt1 shRNA对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响

摘要：

目的 探讨慢病毒载体靶向携带Akt1基因短发夹RNA(Akt1-shRNA)对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响.方法 构建表达Akt1-shRNA的慢病毒载体,转染293T细胞后获得Akt1-shRNA的慢病毒颗粒,病毒感染胃癌SGC-7901细胞(SGC-LV-shAkt1)为实验组细胞,SGC7901细胞和转染慢病毒空载体SGC7901细胞(SGC-LV-shCON)为对照组细胞.Real-Time PCR检测Akt1 mRNA表达水平,Westem blot检测胃癌细胞Akt1、phospho-Akt (ser473)和bcl-2蛋白表达水平,然后流式双染法、生长速率等方法检测Aktl shRNA对SGC-7901细胞凋亡及增殖能力的影响.结果 成功构建Akt1基因RNAi的慢病毒载体LV-shAkt1,病毒滴度为5× 108 TU/mL.SGC-7901细胞转染后,实验组(SGC-LV-shAkt 1)Akt1 mRNA和Akt1、p-Akt、bcl-2蛋白表达水平较对照组(SGC-7901、SGC-LV-shCON)降低(P＜0.01);(38.7±3.5)％的实验组细胞凋亡(P＜0.05).SGC-LV-shAkt1细胞生长曲线平缓,生长速度较另两种细胞(SGC-7901、SGC-LV-shCON)明显降低.结论 靶向Akt1的RNAi能有效抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,下调抗凋亡蛋白bcl-2有关.

关键词：Akt1、慢病毒载体、胃癌、凋亡

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分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81401959

在线出版日期：2017-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：23-27