10.11969/j.issn.1673-548X.2020.06.020
miR-31-5p对胰岛β细胞增殖及2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响
目的 研究miR-31-5p对胰岛 β细胞系MIN6细胞增殖的影响,以及对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用.方法 培养胰岛MIN6细胞,将MIN6细胞分为miR-31-5p mimic组、miR-31-5p mimic NC组、miR-31-5p inhibitor组、miR-31-5p inhibitor NC组.采用脂质体介导法转染MIN6细胞,转染48h后RT-PCR检测细胞miR-31-5p表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况,酶联免疫吸附法测定检测细胞分泌胰岛素的水平.C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、造模组,正常对照组小鼠基础饲料喂养并腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,造模组小鼠高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素30mg/kg构建2型糖尿病小鼠模型.将建模成功的2型糖尿病小鼠随机分为miR-31-5p NC组(尾静脉注射50mg/kg miR-31-5p NC)与miR-31-5p inhibitor组(尾静脉注射50mg/kg miR-31-5p inhibitor),21天后HE染色观察小鼠胰腺组织病理学形态,免疫组织化学染色观察胰岛素与裂解caspase-3的阳性表达情况.结果 转染miR-31-5p mimic和miR-31-5p inhibitor分别增加或抑制了MIN6细胞中miR-31-5p的表达水平;转染miR-31-5p mimic的MIN6细胞增殖能力下降而转染miR-31-5p inhibitor的MIN6细胞增殖能力提高;20mmol/L葡萄糖的KRBH溶液刺激下转染miR-31-5p mimic的MIN6细胞胰岛素的分泌受到抑制,而转染miR-31-5p inhibitor的细胞胰岛素分泌量增加;成功构建2型糖尿病小鼠模型,静脉注射50mg/kg miR-31-5p inhibitor NC的2型糖尿病小鼠出现胰岛萎缩、胰岛细胞细胞核固缩且胞质空泡增多等现象,裂解caspase-3的阳性表达明显,静脉注射50mg/kg miR-31-5p inhibitor的2型糖尿病小鼠胰腺组织病理变化明显改善,裂解caspase-3的阳性表达也减少.结论 抑制miR-31-5p的表达可以促进MIN6细胞系的增殖和在高糖刺激下胰岛素的分泌,并且改善2型糖尿病小鼠胰腺病变的现象.
胰岛β细胞、miR-31-5p、MIN6细胞、增殖、2型糖尿病小鼠、胰腺组织
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R587(内分泌腺疾病及代谢病)
新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目面上项目2018D01C219
2020-07-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
90-95,132