Kv1.3钾通道调节人脐静脉内皮细胞LOX-1受体摄取oxLDL

摘要：

目的 观察Kv1.3钾通道在LOX-1摄取oxLDL中的作用,并探讨其机制.方法 分别以慢病毒载体shRNA-Kv1.3-LV3-pGLV-h1-GFP-puro和Kv1.3-LV5-EF1 a-GFP-Puro转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs),以获得HUVECs细胞中下调和上调表达Kv1.3蛋白.利用全细胞膜片钳技术记录Kv1.3蛋白过表达和下调的HUVECs Kv1.3 I/V曲线.以ox-LDL与HUVECs共孵育后,分别应用免疫比色法和Fluo-3/AM荧光标记法测定细胞内胆固醇和钙离子相对含量.经Western blot法测定Kv1.3、LOX-1、p38、p38磷酸化水平.结果 shRNA950转染组HUVECs Kv1.3 mRNA和蛋白表达量较空白对照组显著降低(P<0.05),过表达转染组Kv1.3 mRNA和蛋白表达量较空白对照组显著升高(P<0.05).Kv1.3表达上调后,I/V曲线上移,该效应可被奎尼丁抑制;Kv1.3表达下调后,I/V曲线下移.Kv1.3过表达组胆固醇相对水平明显高于对照组(P<0.05),shRNA950+oxLDL组胆固醇的相对含量低于oxLDL组(P<0.05).Western blot法检测显示,Kv1.3过表达组的LOX-1蛋白表达量较对照组升高(P<0.05),Kv1.3敲低组的LOX-1蛋白水平较对照组减低(P<0.05);Kv1.3过表达组磷酸化p38与p38蛋白水平的比值高于对照组二者的比值(P<0.05),Kv1.3敲低组磷酸化p38与p38蛋白表达量的比值低于对照组两者的比值(P<0.05).结论 Kv1.3钾通道经p38信号通路参与调节HUVECs LOX-1受体摄取oxLDL.该研究为阐明LOX-1结合oxLDL的电荷依赖性机制增添了新的实验依据.

关键词：Kv1.3钾通道、人脐静脉内皮细胞、血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1、氧化型低密度脂蛋白、p38信号转导通路

所属期刊栏目：49

分类号：R151.3(营养卫生、食品卫生)

资助基金：国家自然科学基金资助项目;宁夏回族自治区自然科学基金资助项目

在线出版日期：2020-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：46-52