外源性一氧化碳释放分子2对脓毒症大鼠T淋巴细胞凋亡的影响

摘要：

目的 探讨外源性一氧化碳释放分子2对脓毒症大鼠T淋巴细胞的影响.方法 采用腹腔注射LPS方法制备脓毒症模型.采用数字表法将28只雄性SD大鼠随机分为阴性对照组(n=7)、LPS组(n=7)、外源性一氧化碳释放分子2(CORM-2)(10mg/L LPS+ 10μmol/L CORM-2干预)、无活性外源性一氧化碳释放分子2(iCORM-2)组(10mg/L LPS+10μmol/LiCORM-2干预).给予相应试剂预处理24h后处死大鼠,收集血液、脾脏、肠系膜淋巴结等标本,进行模型验证,应用流式细胞仪观察和计数CD4与CD8标记阳性T细胞数,计算CD4/CD8阳性细胞比值(CD4+/CD8+),苏木精-伊红(HE)染色观察脾脏组织病理变化,观察T淋巴细胞含量计数,用Western blot法检测Fas、caspase-9、caspase-3的蛋白表达.结果 观察大鼠小肠光镜下形态,与阴性对照组比较,大鼠脓毒症模型造模成功.流式细胞仪观察,与阴性对照组比较,LPS组24h后CD4+T细胞百分比显著降低(41.05％±5.26％ vs 53.06％±6.28％),CD8+T细胞百分比显著降低(33.98％±7.47％ vs 40.33％±7.23％),CD4+/CD8+比值显著降低(1.21±0.70 vs 1.31±0.87),差异有统计学意义(P＜0.05).与LPS组比较,LPS+ CORM-2组24h后CD4+T细胞百分比显著增加(50.02±5.58 vs 41.05±5.26),CD8+T细胞百分比显著增加(38.12±7.41 vs 33.98±7.47),CD4+/CD8+比值显著增加(1.31±0.75 vs 1.21±0.70),差异有统计学意义(P＜0.05).LPS+ iCORM-2组与LPS组上述各指标比较,差异无统计学意义.取脾脏病理学观察,与阴性对照组比较,LPS组T淋巴细胞含量计数在光镜下观察明显减少,与LPS组比较,LPS+ CORM-2组T淋巴细胞含量计数在光镜下观察明显增加.用Western blot法检测Fas、caspase-9、caspase-3的蛋白表达,与阴性对照组比较,LPS组处理24h后,Fas、caspase-9、caspase-3蛋白表达明显上调(P＜0.05),在同时间点,与LPS组比较,经过LPS+ CORM-2处理24h后,Fas、caspase-9、caspase-3蛋白表达显著降低(P＜0.05),LPS+ iCORM-2组与LPS组上述各指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 外源性一氧化碳释放分子2能够在脓毒症模型中通过抑制凋亡蛋白的表达减少T淋巴细胞凋亡.

关键词：外源性一氧化碳分子2、脂多糖、T淋巴细胞

所属期刊栏目：48

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30417002

在线出版日期：2019-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：31-36