心肌特异性启动子引导的rNIS基因的摄碘动力学研究

摘要：

目的 构建肌凝蛋白轻链蛋白-2(myosin light chain-2,MLC-2p)启动子调控的钠/碘转运体(sodium/iodide symporter,NIS)的腺相关病毒载体,探讨外源基因在心肌细胞中特异性表达的可行性.方法 构建rAAV9-rMLC-2p-rNIS及rAAV9-CMV-rNIS重组腺相关病毒,经酶切鉴定及效价测定.rAAV9-rMLC-2p-rNIS及rAAV9-CMV-rNIS体外感染心肌细胞和非心肌细胞,行动态摄碘及NaClO4抑制实验观察NIS蛋白的功能和特性.结果 成功构建rAAV9-rMLC-2p-rNIS及rAAV9-CMV-rNIS,测得效价为rAAV9-rMLC-2p-rNIS 2.46×1012μg/ml,rAAV9-CMV-rNIS 4.21×1012μg/ml.动态摄碘实验表明感染rAAV9-rMLC-2p-rNIS的心肌细胞的Na125I摄取明显高于非心肌细胞,且能被NaClO4特异性抑制,证实了rMLC-2p启动子的心肌特异性及转染细胞表达的rNIS蛋白有功能.结论 成功构建了MLC-2p启动子调控NIS的腺相关病毒载体,证实了外源基因在心肌细胞中的特异性表达,为进一步以该报告基因系统的体内动物实验打下基础.

关键词：肌凝蛋白轻链蛋白-2、腺相关病毒、钠/碘转运体、碘放射性核素

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分类号：R8(特种医学)

资助基金：广州市医药卫生科技项目201102A213021;广州市属高校科研项目10A226;广州医学院博士启动基金2009;广州医学院科研项目2011C49

在线出版日期：2014-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：82-86