ERAP1基因标准品质粒的构建

摘要：

目的 构建人ERAP1基因的重组质粒.方法 以成人皮肤组织中总RNA为模板、Random 6 mers为引物反转录合成cDNA,用该cDNA为模板PCR扩增人ERAP1基因,并克隆到PUC18载体,转化入大肠杆菌DH5α,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.计算重组质粒原液复制数浓度并制备梯度浓度标准品,real-time PCR构建标准曲线.结果 ERAP1目的片段制备成功,获得稳定的重组质粒,保证了目的片段的特异性和序列完整性,标准曲线参数良好,标准品阈值循环数(Ct)与其相应梯度稀释浓度呈良好线性关系,扩增效率高.结论 成功地构建了人ERAP1基因的荧光定量PCR标准品质粒.

关键词：ERAP1基因、荧光定量PCR、标准品质粒

所属期刊栏目：43

分类号：R393

资助基金：新疆维吾尔自治区人民医院院内科研项目20130111

在线出版日期：2014-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：110-112