10.3969/j.issn.1673-548X.2012.03.023
骨髓瘤细胞诱导破骨前体细胞分化的分子机制探讨
目的 探讨入骨髓瘤细胞RPMI8226诱导破骨前体细胞分化的分子机制.方法 采用RT - PCR和Western blotting法检测RPMI8226细胞能表达核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF - κB Ligand,RANKL)蛋白和RANKL裂解酶(TACE、ADAM19) mRNA表达.抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)细胞化学染色鉴定成熟破骨细胞.利用重组人RANKL蛋白(rhRANKL)、条件培养液和人抑制性RANKL单克隆抗体(RANKL mAb)参与培养,诱导RAW264.7细胞分化为成熟破骨细胞.结果 Western blotting法证实RPMI8226细胞表达跨膜型和可溶型RANKL( mRANKL,sRANKL).RT - PCR法证明RPMI8226细胞表达RANKL、RANKL裂解酶和TRAP mRNA.TRAP染色观察RPMI8226细胞、MG - 63细胞条件培养液与rhRANKL均能明显诱导RAW264.7细胞分化为TRAP阳性多核成熟破骨细胞.RT - PCR法证实此3组能刺激RAW264.7细胞上调TRAP mRNA表达.TRAP染色和TRAP mRNA表达中发现RANKL mAb能阻断RPMI8226细胞条件培养液和rhRANKL诱导的破骨前体细胞分化成熟作用.结论 骨髓瘤RPMI8226细胞能表达RANKL,其条件培养液可能含sRANKL,能使RAW264.7细胞分化成TRAP阳性多核成熟破骨细胞.
多发性骨髓瘤、破骨细胞、RANKL
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R73;R39
温州医学院5010重大项目子课题XNK05005
2012-06-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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70-74,124